Használati útmutató
DG -0131-VHL
1. Mérje össze a következő reakciót mintánként mindegyik Master Mix-szel:
-10μl Deltagene VHL Master Mix
-min. 20ng DNS
-MilliQ víz 15 μl-ig
2. Az alábbi programon végezze a PCR reakciót:
|
1.
|
95 ºC
|
3 min
|
|
2.
|
95 ºC
|
20 sec
|
|
3.
|
59ºC
|
20 sec
|
|
4.
|
72 ºC
|
40 sec
|
|
5.
|
GO TO STEP 2.
|
34x
|
|
6.
|
72 ºC
|
5 min
|
|
7.
|
4 ºC
|
HOLD
|
|
8.
|
END
|
|
A kapott PCR terméket futtassa meg 1.5%-os agaróz gélen DNS marker jelenlétében. A különböző mutációk esetén az alábbi fragmentméreteket kapjuk:
Exon1: 530 pb
Exon2: 369 bp
Exon3: 340 bp
A PCR fragmentek megszekvenálásával kimutatható a mutáns allél jelenléte. A szekvenáló primert a kit tartalmazza, mely mind a 3 exon esetén használható.



