Bejelentkezés





 

Használati útmutató
DG -0130-C-Kit
 
 
1. Mérje össze a következő reakciót mintánként mindegyik Master Mix-szel:
 
-10μl Deltagene C-Kit Master Mix
-min. 20ng DNS
-MilliQ víz 15 μl-ig
 
2. Az alábbi programon végezze a PCR reakciót:
 

1.
95 ºC
3 min
2.
95 ºC
20 sec
3.
55ºC
20 sec
4.
72 ºC
30 sec
5.
GO TO STEP 2.
45x
6.
72 ºC
5 min
7.
4 ºC
HOLD
8.
END
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
A kapott PCR terméket futtassa meg 2%-os agaróz gélen DNS marker jelenlétében. A különböző exonok esetén a következő fragmentméreteket kapjuk:
 
 
Exon9-1: 229bp
Exon9-2: 259bp
Exon11: 274bp
Exon13: 214bp
Exon17-1: 315bp
Exon17-2: 252bp
 
 
A PCR fragmentek megszekvenálásával kimutatható a mutáns allél jelenléte. Mindegyik exonhoz a saját szekvenáló primer-jét használjuk, amelyek a kitben megtalálhatóak.