Bejelentkezés





 

Használati útmutató
DG-0129-PDGFRA
 
 
1. Mérje össze a következő reakciót mintánként mindegyik Master Mix-szel:
 
-10μl Deltagene EGFR Master Mix
-min. 20ng DNS
-MilliQ víz 15μl-ig
 
 
 2. Az alábbi programokon végezze a PCR reakciót:
 
 
A 10. 14. 18. exonok esetén:
 

1.
95 ºC
3 min
2.
95 ºC
20 sec
3.
62ºC
20 sec
4.
72 ºC
30 sec
5.
GO TO STEP 2.
45x
6.
72 ºC
5 min
7.
4 ºC
HOLD
8.
END
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
A 12. exon esetén:
 

1.
95 ºC
3 min
2.
95 ºC
20 sec
3.
55ºC
20 sec
4.
72 ºC
30 sec
5.
GO TO STEP 2.
45x
6.
72 ºC
5 min
7.
4 ºC
HOLD
8.
END
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
A kapott PCR terméket futtassa meg 2%-os agaróz gélen DNS marker jelenlétében. A különböző exonok esetén az alábbi fragmentméreteket kapjuk:
 
Exon10: 361bp
Exon12: 302bp
Exon14: 264bp
Exon18: 262bp
 
A PCR fragmentek megszekvenálásával kimutatható a mutáns allél jelenléte. Mindegyik exonhoz a saját szekvenáló primer-jét használjuk, amelyek a kitben megtalálhatóak.