Bejelentkezés





 

Használati útmutató
DG -0128-BRCA2
 
 
1. Mérje össze a következő reakciót mintánként mindegyik Master Mix-szel:
 
-10μl Deltagene BRCA2 Master Mix
-min. 20ng DNS
-MilliQ víz 20 μl-ig
 
2. Az alábbi programon végezze a PCR reakciót:
 

1.
95 ºC
3 min
2.
95 ºC
30 sec
3.
64ºC
30 sec
4.
72 ºC
30 sec
5.
GO TO STEP 2.
39x
6.
72 ºC
5 min
7.
4 ºC
HOLD
8.
END
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
A kapott PCR terméket futtassa meg 1.5%-os agaróz gélen DNS marker jelenlétében. A különböző mutációk esetén az alábbi fragmentméreteket kapjuk:
 
 

Mutáció neve
Fragmentméret
Szekvenáló primer
6079delAGTT, 6174delT, 6274delT
526bp
forward
8034insAG
517bp
reverz
8138delCCTTT
518bp
8138 szek. primer
9326insA
472bp
forward

 
 
A PCR fragmentek megszekvenálásával kimutatható a mutáns allél jelenléte. A fenti táblázatban látható, hogy a különbőző mutációk esetén melyik szekvenáló primer használandó, melyek a kitben megtalálhatóak.